导读：选择一种蛋白测定 *** 时，需要考虑两个重要因素：缓冲液的化学组成和检测的蛋白量。基于dford *** 的QuickStartBradford和Bio–Rad蛋白测定灵敏度高，可以兼容糖、巯基乙醇、DTT等。而对于去污剂和NaOH这两种干扰Brad
选择一种蛋白测定 *** 时，需要考虑两个重要因素：缓冲液的化学组成和检测的蛋白量。基于dford *** 的Quick
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Bradford和Bio–Rad
蛋白测定灵敏度高，可以兼容糖、巯基乙醇、DTT等。而对于去污剂和NaOH这两种干扰Bradford测定的物质，DC蛋白测定却可以兼容。
如果蛋白是在loading
buffer中，准备跑1D或2D电泳，或者刚从细胞裂解液中抽提出来，需要定量，那么RC
DC蛋白测定更合适。
扩展资料：
常见测试 *** ：
Quick
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Bradford 蛋白测定是一种简单、精确的蛋白浓度定量 *** 。现成的1倍浓度染料和7
个预稀释浓度(0125、025、05、
075、10、15、20
mg/ml)的蛋白标准品，让你拥有现成的检测工具。无需稀释标准品和染料，一步完成蛋白浓度定量。
Bio–Rad
蛋白测定 也是一种简单的蛋白浓度测定 *** 。该 *** 适应标准浓度测定、低浓度微量测定，或96孔微孔板的快速测定。它的基本原理和流程和上面的Quick
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Bradford都是一样的，不过要麻烦一点点。因为除了要稀释蛋白标准品，配成几个不同浓度之外，还要稀释染料，再过滤除去不溶颗粒。
Quick
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Bradford
和Bio–Rad
蛋白测定 *** 的起源都是Bradford染料结合 ***
(Bradford
1976)，该 *** 检测考马斯亮蓝G–250染料与蛋白结合时(主要结合碱性或芳香族氨基酸残基)的颜色变化。这种测定 *** 能定量多数蛋白或多肽(分子 量>
3,000–5,000
Da)，操作简单、速度快，灵敏度高，与一些还原剂(如DTT、巯基乙醇)兼容。
DC
(Detergent
Compatible)
蛋白测定 是一种适用于含有去垢剂的蛋白样品比色测定 *** 。该 *** 类似于常规的Lowry
测定 ***
(Lowry
et
al1951)，但经过改良，节省了操作时间。DC
蛋白测定只需要15分钟的温育过程，而且吸光值读数能保持2小时的稳定。
RC
DC
(Reducing
agent
Compatible
&
Detergent
Compatible)
蛋白测 定是一种适用于含还原剂和去垢剂的蛋白样品比色测定 *** 。
以
Lowry
*** (Lowry
et
al1951)为基础的
RC
DC
蛋白测定，具有原来DC蛋白测定的特点，并能与更多的试剂兼容，简化了复杂蛋白样品溶液的定量测定。吸光值至少稳定1小时。
除了与DC
蛋白测定兼容的试剂外，RC
DC
蛋白测定还与以下试剂和缓冲液兼容：2%
CHAPS、350
mM
DTT、01M EDTA 、Laemmli
缓冲液、10%
beta-巯基乙醇、ReadyPrep
抽提试剂等。
搜狗百科--BCA蛋白浓度检测
蛋白质浓度测定 *** 如下：
1、紫外分光光度法
紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的 *** ，不需要任何试剂，操作简单且易回收。
蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收，这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的，所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。另外 *** 白或提取过程中杂有的核酸对测定结果引起极大误差，其大吸收在260nm。
所以同时测定280及260nm两种波长的吸光度，通过计算可得较为正确的蛋白质含量。
2、Folin-酚试剂法
此法的特点是灵敏度高，较双缩脲高两个数量级，较紫外法略高，操作稍微麻烦，反应约在15分钟有大显色，并少可稳定几个小时，其不足之处是干扰因素较多，有较多种类的物质都会影响测定结果的准确性。
其原理是蛋白质中含有酚基的酪氨酸，可与酚试剂中的磷钼钨酸作用产生兰色化合物，颜色深浅与蛋白含量成正比。
3、考马氏亮蓝G-250
染料结合法测定蛋白质的优点是灵敏度较高，可检测到微量蛋白，操作简便、快迅，试剂配制极简单，重复性好，但干扰因素多。
考马氏亮蓝G－250具有红色和青色两种色调、在酸性溶液中游离状度下为棕红色，当它通过疏水作用与蛋白质结合后，变成蓝色。
大吸收波长从465nm转移到595nm处，在一定的范围内，蛋白质含量与595nm的吸光度成正比测定595nm处光密度值的增加即可进行蛋白质的定量。
关于测定蛋白质浓度的波长分享如下：
测定蛋白质浓度是实验室中经常进行的一个分析操作，可以用于生物学、医学等领域。波长在此过程中起到了非常重要的作用，因为不同波长的吸光度与蛋白质的含量是有一定关系的。下面将从蛋白质吸收光谱和波长选择两个方面详细解答测定蛋白质浓度的波长问题。
一、蛋白质吸收光谱：
蛋白质在紫外线及可见光范围内均有吸收现象，通常更大吸收点位于280nm处，且吸收强度较高。这种吸收主要是由于蛋白质结构中存在芳香族氨基酸色氨酸（Trp）、酪氨酸（Tyr）和苯丙氨酸（Phe）等引起的。
其中色氨酸对紫外线的吸收最敏感，在278-282nm范围内吸收强度更高，而酪氨酸和苯丙氨酸对于紫外线的吸收较弱，一般在260-270nm处吸收。
由于280nm处的吸收峰强度较高，因此常用其来测定蛋白质的含量。但如果在光谱范围内存在干扰物质，则需要选择波长进行校正和测量。
二、波长选择：
1、280nm测定法：在实验室中，常用280nm光波来浓度蛋白质浓度。这是因为，这一波长靠近蛋白质吸收光谱更大吸收点，对于大部分蛋白质都存在准确的判断作用。如果样品中的异物或钯氰离子存在时间过长等原因导致功效下降，可以考虑试用其他波长。
2、布拉德福德（Bradford）法测酸洗木瓜蛋白质浓度：尽管280nm测定法取得很好的效果,但还是存在精确度较低和被不同物质影响诸多问题。
布拉德福德法不仅抗含量更加灵活，而且选择波长也有好处。首先将蛋白质样品通过酸洗法进行分解，并与Coomassie普通用染料结合，形成紫色复合物，可选择在595nm的波长进行测量。只要选波长正确，则可以测定出蛋白质的浓度。
3、其他 *** ：从理论和实践经验看，测定蛋白质浓度还有其他一些波长供科学家们选择,如230nm，240nm，或者各种二极管颜色。但是，科学家们通常不选择这些波长，因为它们的吸光度相比280nm的波长不够大或者有其他物质干扰问题。
总之，选择合适的波长测定蛋白质浓度是非常重要的。需要注意适当考虑样品中可能存在的物质，以及根据济普同于洋手段，准确选定实验波长
