.jpg)
导读：分类: 教育/科学 >> 科学技术 问题描述: 求助!为什么我们自己倒的血平板会出现许多不规则的片状琼脂凝块 解析: 如出现许多不规则的片状琼脂凝块，多半是由于琼脂融化不完全造成的，建议多加热一段时间，使琼脂完全融化，并充分
分类: 教育/科学 >> 科学技术
问题描述:
求助!为什么我们自己倒的血平板会出现许多不规则的片状琼脂凝块
解析:
如出现许多不规则的片状琼脂凝块，多半是由于琼脂融化不完全造成的，建议多加热一段时间，使琼脂完全融化，并充分混匀。另外，培养基凝固的时候建议不要急冷，在自然条件下缓慢冷却，使培养基自然凝固。
普通琼脂平板是基本培养基，能为大多数菌种提供营养物质，通过观察普通琼脂平板的特征，可以判断菌落的大小，分布。血平板是一种增菌培养基，如肺炎链球菌只能在含有血液或血清的培养基中存活，还可以通过观察血平板中菌落的溶血，将菌种分为甲型溶血，乙型溶血，丙型溶血。
哥伦比亚琼脂培养基（Columbia Agar Base）营养非常丰富，主要用于营养要求较高的细菌（弯曲菌、幽门螺杆菌等）的培养及溶血试验，还可用于药品中梭菌的检测。
主要成分：
酪蛋白胰酶消化物
心胰酶消化物
玉米淀粉
肉胃酶消化物
酵母浸出粉
氯化钠
琼脂
5%脱纤维羊血
有关纸片扩散法药敏实验叙述正确的是介绍如下：
纸片扩散法（K-B法）药物敏感试验是在涂有细菌的琼脂平板培养基上按照一定要求贴浸有抗菌药的纸片，培养一段时间后测量抑菌圈大小，并根据相关解释标准进行结果分析，从而得出受试菌株药物敏感性的结论。
1 待测菌株接种物制备
（1）通用情况：从过夜孵育的平板，优先选择哥伦比亚血琼脂平板上的菌落上挑取数个单个菌落，直接接种45%生理盐水制成菌悬液，使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到05麦氏单位，使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌（1-2）1012CFU/mL浓度。
（2）特殊情况：嗜血杆菌属（本程序中所指的嗜血杆菌仅包括流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌）：从过夜孵育的HTM平板，直接接种45%生理盐水制成菌悬液，使用比浊仪调整悬液的浊度使其达到05麦氏单位，使菌悬液中含有相当于ATCC 25922大肠埃希菌1012CFU/mL浓度。
2接种平板
（1）调整好悬液的浊度后，用无菌棉签浸入悬液内，紧贴试管内壁在液体上方旋转拭子数次，除去棉签上多余的液体，但也应适度。
（2）用拭子划线整个琼脂表面，从平板顶部到底部，均匀涂布，重复两次此过程（一共三次）每次旋转平板约60度，确保每次接种菌液均匀分布，最后在琼脂平板的边缘涂抹一圈，防止有流动的菌悬液，并使菌液涂布于整块平板的每个角落。
（3）涂布菌液完成的平板，可在室温放置一会（3-5分钟），以便在放置含有药物的纸片前使琼脂吸收表面多余的水分，但放置时间不应超过15分钟。
3放置测试药敏纸片
根据测试菌的不同，按照预先设定的分组，将抗菌药物纸片贴于已接种细菌的琼脂表面，每个纸片必须压下以确保与琼脂表面完全接触无论是单独放置的纸片或有纸片分配设备纸片必须分布均匀，两纸片之间圆心的距离不少于24mm，纸片边缘距离琼脂边缘不少于15mm。
我室使用的MH平板直径为90mm，放置不超过5块纸片。由于一些药物几乎是瞬间扩散的，因此，一旦纸片与琼脂表面接触就不能再移动位置，若位置不佳可在琼脂的另一个位置重新放置一个纸片。
4孵育
（1）通用情况：在放置好纸片后，15分钟内，将MH琼脂倒置于号孵箱（35℃）中，孵育16～18小时（除外下面列出的需要延长孵育时间的情况）。嗜血杆菌属、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌和链球菌KB纸片法测试平板应放置于含有5% CO2的环境进行孵育。
（2）延长时间培养：①测试苯唑西林、头孢西丁对葡萄球菌的敏感性时，孵育时间必须达到24h，才能满足对结果判断的要求。②测试万古霉素对金**葡萄球菌及肠球菌属的敏感性，孵育时间必须达到24小时。
5抑菌环直径测量
（1）通用情况：35℃，经过16～18小时的孵育后，将贴有纸片的MH平板置于黑色不反光的背景上，采用游标卡尺，来测量抑菌环的直径（完全抑制区的直径），可以从平板的背面，利用反射光，用肉眼观测，读取最接近的毫米数（读取一个整数）。
没有肉眼可见的明显的生长的部位即是抑菌环的边缘。一般情况下，在抑菌环边缘出现只能在放大镜下观察到的微小菌落，可以忽略不计。
MH平板上的抑菌环呈均匀的圆形，测试菌株在平板上呈现融合生长菌苔，若出现单个菌落稀疏生长的情况，则说明接种时调制的菌液浓度过稀，需要寻找可能的原因，并重新再一次进行测试。
（2）特殊情况：①苯唑西林对葡萄球菌的抑菌环：抬起平皿，对向光源，利用透射光观察苯唑西林纸片周围的抑菌环中是否有任何细微的菌落生长，若是出现任何可以辨别的生长，均应判定苯唑西林耐药。
②利奈唑胺对葡萄球菌的抑菌环：利用透射光，用游标卡尺读取抑菌环的数值。③复方新诺明的抑菌环：MH平板中存在一定量叶酸抑制剂的拮抗剂，会导致测试菌轻微的生长，因此，在测量复方新诺明的抑菌环直径时应当忽略细微的生长情况（约20%），而将明显出现生长的地方作为抑菌环的边界进行测量。
